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目前，随着FDA批准了美国公司Moderna研发的新冠肺炎疫苗mRNA-1273的紧急使用授权，基于mRNA的治疗方法越来越引起大家的兴趣，基于mRNA的研究也越来越多，所以，如何获得纯度高，质量高的mRNA越来越受到人们的关注。

真核细胞的mRNA是单顺反子，其最显著的特征是具有５'端帽子结构和3'端的poly A的结构，此poly A结构为mRNA的提取提供了有效的途径，人们利用碱基配对原理，开发出寡聚(dT)纤维素或寡聚(U)琼脂糖亲和柱分离mRNA的方法，近几年,mRNA的提取方法又有所改进和突破,其中就有mRNA的磁珠分离纯化方法。该技术主要包含2种方法，其一是用生物素标记的Oligo(dT)与mRNA3'端的poly A退火形成杂交体，然后用带有链霉亲和素的顺磁磁珠洗涤并捕获杂交体，形成杂交体－磁珠复合体，最后用磁架将此复合体捕获；其二是直接用Oligo(dT)磁珠捕获样本中的mRNA,进一步用无RNase无菌水洗涤，即可获得纯化的mRNA。

接下来，Dr. BEAVER就给大家介绍下1. Oligo dT磁珠的工作原理及应用。

1. Oligo dT磁珠的工作原理及应用

Oligo dT磁珠是一种表面共修饰了寡聚dT序列,利用磁珠表面的寡聚dT序列可以和mRNA的polyA尾之间的碱基配对，因此可以从真核总RNA或者细胞、动植物组织等多种样本中快速分离纯度高且完整的mRNA。经Oligo dT磁珠纯化的mRNA,可应用于RT-PCR, 固相cDNA文库构建、二代测序、Northern Blot分析、引物延伸、基因表达分析、RACE、RNA测序、亲和纯化、微阵列、cDNA微阵列、S1核酸酶分析、核糖体酸酶保护测定等分子生物学实验，还可进行mRNA疫苗的研究等。

2. 国产品牌的崛起

海狸公司专注于纳米磁珠技术和产品开发。公司10年来，技术不断迭代，已经完成了第一代蛋白分离纯化磁珠、第二代核酸纯化磁珠及第三代免疫检测磁珠的研发和规模化生产。海狸技术团队经过2年多的研发和验证，推出BeaverBeads Oligo (dT)磁珠，可用于mRNA的纯化。

BeaverBeads Oligo (dT)产品特点：

a) 表面活性位点丰富，mRNA捕获效率高

b) 非特异性吸附低，mRNA纯度高

c) 粒径均一，悬浮性好，沉降速率低

d) 磁响应时间短，可适用于自动化操作

e) 工业化规模生产，批次稳定

应用案例一：

样本：人细胞Total RNA

上样量：300ng Total RNA

磁珠用量：20-50μL

实验结果：

实验操作过程中，BeaverBeads Oligo (dT)磁珠的悬浮性与进口品牌D相当。从人细胞total RNA样本中纯化mRNA，采用荧光定量PCR对样本进行定量检测，对mRNA（特异性）和sRNA（非特异性）检测的Ct值偏差＜0.1，两品牌磁珠无明显差异。

应用案例二：

样本：植物Total RNA

上样量：600ng Total RNA

磁珠用量：20-50μL

实验结果：

实验结论：BeaverBeads Oligo (dT)磁珠，悬浮性与进口品牌D相当，从植物的total RNA样本中纯化mRNA，采用荧光定量PCR对样本进行定量检测，对mRNA（特异性）和sRNA（非特异性）检测的Ct值偏差＜0.15，两品牌磁珠无明显差异。

产品信息：

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