海狸磁珠之兴奋剂检测高效样本处理及自动化
兴奋剂检测是确定运动员是否使用了违禁物质的检测手段,主要包括有色谱法、质谱法、气相“色谱-质谱”联用、液相“色谱-质谱”联用、化学发光免疫分析法、电化学法、基因兴奋剂检测法等。
其中,色谱-质谱联用可被用于大部分兴奋剂检测,包括蛋白同化制剂,肽类激素,利尿剂、糖皮质类固醇等等。免疫分析法[1]是利用抗原和抗体特异性结合反应实现对禁用药物的检测,主要用于类固醇和激素类兴奋剂的检测,例如利用等电聚焦-免疫双印迹化学发光法检测促红细胞生成素兴奋剂,解决了尿样中该类物质浓度低的问题。
兴奋剂检测的样本一般包括尿液和血液,干扰物质较多,因此样本前处理是确保检测结果准确性和可靠性的关键步骤。常见方法包括液液萃取法、固相萃取法和免疫亲和净化等。海狸为广大用户提供磁珠和自动化样本处理仪,用于兴奋剂检测样本前处理,可提高检测灵敏度和效率。
方法一:免疫亲和磁珠
利用抗体与兴奋剂的特异性结合反应,将磁珠作为载体偶联特定抗体,通过磁场作用实现目标兴奋剂的富集与分离。具有特异性强,操作相对简便,可实现自动化处理,提高检测效率的优势。能从复杂基质中精准捕获目标分析物,减少杂质干扰,适用于各类生物样本(如血液、尿液)中痕量兴奋剂的富集,尤其适合结构复杂、难以用传统方法分离的兴奋剂。
图1. 免疫亲和磁珠兴奋剂净化原理示意图
产品推荐:
1.BeaverBeads®链霉亲和素系列磁珠
10-30min固定生物素化抗体/蛋白;
操作条件温和。
2.BeaverBeads®NHS系列磁珠
操作简单,1h完成生物配体共价偶联;
高效偶联,载量高达30mg/mL磁珠。
图2.免疫亲和磁珠和自动化操作系统
方法二:固相萃取磁珠
磁性固相萃取(mSPE)是一种以磁性或可磁化的材料作为吸附剂的分散固相萃取技术,相比传统固相萃取(SPE),具有超顺磁、比表面积大、避免堵塞柱子、操作简单、可自动化等诸多优势[2,3]。
产品推荐:
1.BeaverBeads® mSPE系列磁珠
回收效率达90%以上;
自动化操作时间小于15min。
图3. 固相萃取磁珠及自动化操作系统
产品参数
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参考文献:
[1] Wang H , Dou P ,Chenchen Lü,et al. Immuno-magnetic beads-based extraction-capillary zone electrophoresis-deep UV laser-induced fluorescence analysis of erythropoietin[J]. Journal of Chromatography A, 2012, 1246(none): 48-54. DOI: 10.1016/j.chroma.2012.02.017.
[2] GB/T 22965-2008,牛奶和奶粉中12种β-兴奋剂残留量的测定 液相色谱-串联质谱法[S].
[3] GB/T 22950-2008, 河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中12种β兴奋剂残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 [S].