BeaverBeadsTM Protein A（or Protein G）抗体纯化磁珠系列产品是由 NHS 活化的超顺磁性微球与Protein A（or Protein G）共价结合形成的复合微粒。
- 产品货号:70814-5
- 产品单位:瓶
- 产品说明:5 mL, 10%(V/V), 10-30 µm
产品介绍：
BeaverBeadsTM Protein A（or Protein G）抗体纯化磁珠系列产品是由 NHS 活化的超顺磁性微球与Protein A（or Protein G）共价结合形成的复合微粒。与当前国际免疫磁珠市场上同类产品相比，该产品具有更高的抗体结合能力和较低的蛋白非特异吸附率，洗脱条件更均一，一步纯化即可从血清样品中分离出纯度大于 90%的抗体。
本产品为微米级磁性微球，熟练操作可在 15 min 内完成抗体吸附过程，30 min 内完成抗体纯化流程。本产品可重复使用，适用于血浆、腹水、组织培养上清液等样品中的抗体纯化，也可用于抗体固定及其它相关研究。用户可根据目标抗体的种属来源及亚型选择磁珠的类别，Magrose Protein A，Magrose Protein G 磁珠与不同抗体的亲和性比较参见附表 1。
产品信息:
操作流程(以纯化人血清 IgG 为例)：
1. 样品处理：取人血清 100 µL 至 1.5 mL EP 管中，接着加入 900 µL 结合洗涤液，充分混匀。
2. 磁珠预处理：将抗体纯化磁珠漩涡振荡 30 s，使磁珠充分重悬；取 200 µL 10%（v/v）磁珠悬液置于另一新的 1.5 mL EP 管中。对磁珠悬液进行磁性分离，弃上清液，用 1 mL 结合洗涤液 洗涤 2 次，磁性分离，管中磁珠可直接用于抗体分离。
注意事项：该步骤磁珠的用量可根据磁珠对目标抗体的最大结合量进行调节，当目标抗体的浓度大于150 µg/mL 时，用户可取 1.2~1.5 倍磁珠用量（计算方式：如 1.5*样品中目标抗体含量/磁珠最大结合量），若目标抗体浓度过低，如低于 70 µg/mL 时，客户为了提高抗体回收率，可增加磁珠用量，如提高至 3 倍磁珠用量。
3. 抗体吸附：在步骤2 预处理的磁珠管中加入步骤1 处理的样品溶液，漩涡振荡均匀，在室温下（约25℃） 置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转 EP 管，促使样品和磁珠充分接触并吸附，翻转约 15 min 后进行磁性分离，移弃上清液。
4. 磁珠洗涤：向EP 管中加入 1 mL 结合洗涤液，振荡重悬磁珠后进行磁性分离，移弃上清液； 该操作重复 3 次。
5. 抗体洗脱：在上述完成磁珠洗涤的 EP 管中加入 0.5~1.0 mL 洗脱液，用移液器吹打或者涡旋震荡下迅速重悬，然后在室温下（约 25℃）置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转 EP 管，翻转 10 min 后进行磁性分离，收集上清液至新的 EP 管。
注意事项：该步骤 洗脱液 用量，建议客户使最终洗脱的抗体浓度控制在 0.6~1.2 mg/mL，此时第1 次洗脱条件中 95%以上的抗体将被洗脱下来；若洗脱液用量过少，会导致部分抗体在第 1 次洗脱时仍然留在磁珠上，从而导致抗体回收率降低。
6. 抗体中和：在步骤 5 抗体洗脱液中加入一定量的 中和液，一般为抗体洗脱体积的 1/10，最终使洗脱的抗体pH 值保持中性环境，以利于维持抗体的生物活性，避免抗体失活。
7. 磁珠后处理：使用后的磁珠用 洗脱液 洗涤 2 次，磁性分离，弃上清液；接着用 结合洗涤液 洗涤 3 次，磁性分离，弃上清液，加入 200 µL 保存液 重悬磁珠，置于 2~8℃保存。
附表 1： Protein A 和 Protein G 与不同来源及类型的抗体亲和性比较
