人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）
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BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）适用于人外周血样本中性粒细胞（CD16+CD66b+）的分选。将人外周血进行红细胞裂解后，仅需25分钟即可通过磁性分选获得纯度高达98%的人中性粒细胞。

  • 产品货号:71002-10
  • 产品单位:盒
  • 产品说明:for 1×10^8 cells

BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）适用于人外周血样本中性粒细胞（CD16+CD66b+）的分选。将人外周血进行红细胞裂解后，仅需25分钟即可通过磁性分选获得纯度高达98%的人中性粒细胞。


产品特点

  • 操作简捷：无需分离柱，搭配磁性分离器25分钟即可完成分选操作；

  • 高纯度：分选后中性粒细胞纯度可达98%；

  • 高活性：分选过程不影响细胞活性，可获得无抗体标记的功能良好的中性粒细胞。


    • 测评数据


使用BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）从人外周血分选中性粒细胞，对分选后的中性粒细胞进行纯度、活率及细胞功能分析：

1、细胞纯度分析

用BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）从人外周血分选中性粒细胞。分选前后的细胞用Alexa Fluor 647标记的anti-human CD66b抗体（克隆号6/40c）和FITC标记的anti-human CD16抗体（克隆号3G8）染色后进行流式细胞仪分析，分选前后的中性粒细胞纯度分别为58.81 %和98.08 %。

图1.流式检测分选前后中性粒细胞纯度


2、细胞活率分析

用BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）从人外周血分选中性粒细胞。分选前后的细胞用7-AAD染色后进行流式细胞仪分析细胞活率。分选前活细胞比例为94.52%，分选后活细胞比例为96.29%。

图2.流式检测分选前后中性粒细胞活率


3、细胞功能学检测

（1）ROS检测

用BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）从人外周血分选中性粒细胞，然后检测PMA刺激后产生ROS的能力。37℃培养条件下，PMA刺激分选后的中性粒细胞10分钟，通过流式细胞术检测底物DCFH-DA（2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯）的氧化情况，以评估细胞内ROS的生成能力。结果显示，PMA刺激后中性粒细胞的ROS释放水平较静息状态显著升高。

图3.流式分析中性粒细胞PMA刺激前后ROS的释放水平


(2) 中性粒细胞表面蛋白CD66b表达检测

使用BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）从人外周血中分选中性粒细胞，将分选后的细胞经 PMA 刺激10分钟或30分钟后，通过流式细胞术检测膜表面 CD66b 的表达水平。结果显示，PMA刺激可显著增强中性粒细胞CD66b的表达，且其表达水平随刺激时间延长而逐渐上升。

图4.流式分析中性粒细胞PMA刺激前后CD66b表达水平


4、竞品分选对比

对比BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）和竞品试剂盒分选得到的中性粒细胞的纯度、活率、得率和细胞功能。

（1）分别使用BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）和竞品试剂盒分选人外周血中性粒细胞，并对分选后的中性粒细胞进行纯度检测。结果显示，使用BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）分选得到的中性粒细胞（CD16+ CD66b+）纯度高于对照竞品组。

图5.BEAVER试剂盒与对照试剂盒分选中性粒细胞纯度比较


（2）分别使用BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）和竞品试剂盒分选人外周血中性粒细胞，对分选后的中性粒细胞进行活率分析。BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）分选得到的中性粒细胞活率可达98.49%，与对照竞品组相当。

图6.BEAVER试剂盒与对照试剂盒分选中性粒细胞活率比较


（3）对比BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）和竞品试剂盒组分选中性粒细胞的得率，结果表明BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）在中性粒细胞得率上优于竞品对照。

图7.BEAVER试剂盒与对照试剂盒分选中性粒细胞得率比较


（4）分别使用BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）和竞品试剂盒分选人外周血中性粒细胞，对分选后中性粒细胞进行功能学检测，分析PMA激活前后中性粒细胞膜表面CD66b的表达水平。结果显示，BeaverBeads® 人中性粒细胞分选试剂盒（阴选）分选得到的中性粒细胞功能良好，与竞品对照组相似，经PMA刺激后可显著上调CD66b的表达水平。

图8.BEAVER试剂盒与对照试剂盒分选中性粒细胞CD66b表达水平对比