磁珠法活化T细胞的原理简介——BeaverBeads® Streptavidin 5μm(Cat. 22306)
T淋巴细胞(T lymphocyte)作为适应性免疫应答中的核心,它们不仅介导适应性细胞免疫应答,在胸腺依赖性抗原诱导的体液免疫应答中亦发挥着重要的辅助作用。T细胞分化发育相当复杂,又在体内不断更新,在同一时间可以存在不同发育阶段和功能的亚群。这给科研工作者的研究带来了一定的难度。随着医学免疫学的发展,T细胞体外分选和活化技术的诞生,为T细胞的研究带来了新的生机。
T细胞的活化
初始T细胞的完全活化需要两种活化信号的协同作用(即双信号模型,two-signal model)。
第一信号由TCR(T cell receptor)识别APC(antigen presenting cell)提呈的pMHC(抗原肽-MHC分子复合物)产生,经CD3转导信号,CD4或CD8辅助。第一信号使T细胞初步活化,是特异性信号。
第二信号(共刺激信号)则由APC或者靶细胞表面的共刺激分子与T细胞表面的共刺激分子相互作用而产生。共刺激分子主要包括CD28家族,CD2,ICAM等及其相应的配体。第二信号使T细胞完全活化,分泌细胞因子和表达细胞因子受体。
T细胞在接受第一信号之后,如没有共刺激信号,T细胞活化后处于低反应性或克隆失能状态,很快进入凋亡。
目前常利用抗CD3的抗体提供第一信号,抗CD28抗体刺激提供共刺激信号,来使T细胞充分活化。
传统的T细胞活化方法
目前传统T细胞活化和扩增的方法既繁琐又复杂,不易掌控。
常用的可溶性或与包被在板上的抗体刺激T细胞也不是理想的解决方案。可溶性抗体一旦加入,刺激便不容易消除,而固定在板上的抗体大大减少了与T细胞接触的机会,弱化了活化效力,更重要的是,这种方法不能形成免疫突触,仅靠单一刺激的累加,达不到理想的活化效果。
还有一种方案是使用有丝分裂原来直接诱导静息T细胞的活化和增殖。常见的T细胞丝裂原有ConA(刀豆蛋白A)和PHA(植物血清素),但它们的作用是非特异性的,无法针对特定的T细胞。
BeaverBeads® Streptavidin-5μm用于T细胞分选与活化
BeaverBeads® Streptavidin-5μm为T细胞分选和活化提供了更简单的方法。 链霉亲和素-生物素(SA-Biotin)系统具有极高的结合亲和力,BeaverBeads® Streptavidin采用海狸专利的蛋白偶联技术将SA共价连接于固相载体表面,可高效结合生物素化抗体。
进行T细胞的分选与激活时,搭配生物素标记的抗CD3和CD28抗体即可。
5μm大小,可更好的模拟APC,激活T细胞。
磁性更强,可轻松地分离细胞,且磁珠不易残留。
BeaverBeads® Streptavidin-5μm激活T细胞的工作原理