BeaverBeads™ Protein A用于进行免疫共沉淀和纯化实验
该研究利用BeaverBeads™ Protein A对MEL 624.38细胞的MHC I-短肽复合物进行免疫共沉淀和纯化实验，通过MHC I表征在MEL 624.38细胞上呈递的肽并进行MS分析，并对EA1和EA1 HL-vcMMAE的体外功效、TL-ADC的诱导细胞凋亡的活性等进行测定，研究结果验证了使用分选酶A产生的TL-ADC靶向肿瘤特异性细胞内蛋白质的策略，无论是否存在药物，都可以增加现有的TCR表位多肽。
浙江大学药学院陈枢青教授等在出版于Biomaterials 8.806的利用sortase a产生的靶向细胞内黑色素瘤抗原MART-1的tcr样抗体-药物偶联物(TL-ADCs)消除黑色素瘤中发现：
HLA I（人类白细胞抗原 I）可以呈递细胞内肿瘤相关蛋白的肽和细胞表面上的体细胞突变蛋白，形成HLA –短肽复合物作为T细胞受体识别的肿瘤特异性抗原。因此，，HLA介导的细胞内肿瘤抗原肽的呈递提供了区分肿瘤细胞和正常细胞的可行方式。这对于拓展抗原选择，尤其是对高细胞毒性的抗体-药物偶联物（ADC）具有重要的意义。
MART-1蛋白，是一种特异性识别转移性黑素瘤的黑色素细胞分化抗原，该研究应用分选酶A介导的缀合，开发了靶向细胞内MART-1的类T细胞受体药物偶联物（TL-ADC）EA1 HL-vcMMAE。TL-ADC能够通过特异性识别由MHC I-短肽复合物贡献的构象表位来模拟TCR结合。因此，TL-ADC可以通过在与MHC I-短肽复合物结合时递送高毒性试剂（例如MMAE）而特异性杀死靶向肿瘤细胞。
该研究利用BeaverBeadsTM protein A对MEL 624.38细胞的MHC I-短肽复合物进行免疫共沉淀和纯化实验，通过MHC I表征在MEL 624.38细胞上呈递的肽并进行MS分析，并对EA1和EA1 HL-vcMMAE的体外功效、TL-ADC的诱导细胞凋亡的活性等进行测定，研究结果验证了使用分选酶A产生的TL-ADC靶向肿瘤特异性细胞内蛋白质的策略，无论是否存在药物，都可以增加现有的TCR表位多肽。
图 纯化后的MEL 624.38黑素瘤细胞的HLA-A2呈递的肽和合成的MART-126-35 MS光谱比较
