论文解析 | BeaverBeads® Streptavidin用于分选CD8+T细胞,纯度高达95%!
以BeaverBeads® Streptavidin为分选工具,在脾和淋巴结样本混合的单细胞悬液中,使用阴选的方式纯化分选出CD8+T细胞,细胞纯度高达95%!
研究背景 细胞毒性T淋巴细胞(CTL)通常称为CD8+T细胞,是白细胞的亚部,为一种特异T细胞,专门分泌各种细胞因子参与免疫作用。对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用,与自然杀伤细胞构成机体抗病毒、抗肿瘤免疫的重要防线。Naive/静息CD8+T细胞有惊人的能力,能扩增和分化为细胞毒性效应细胞,监视体机并清除感染。CD8+T细胞的缺失会破坏抗肿瘤免疫,增加对肿瘤生长的敏感性。CD8+T细胞功能失调也可能引发过度的免疫反应,从而导致免疫介导的损伤或病理。因此研究CD8+T细胞的分化机制对癌症、传染病和自身免疫性疾病的T细胞治疗具有重要应用价值。
使用BeaverBeads® Streptavidin阴选纯化来自WT和C1qbp-tKO P14小鼠CD8+T细胞,通过同源CD90表达将供体细胞与宿主细胞区分开。在感染前1天,通过尾静脉注射5×105细胞(感染3天)、5×104细胞(感染5天)和3×104细胞(感染7天)到受体小鼠体内。在第3天和第8天,通过双侧腹腔注射,分别用2×105或5×105个单位的LCMV Armstrong菌株感染小鼠进行实验。
实验流程示意图(文章原图)
线粒体磷酸化和有氧糖酵解磷酸化(OXPHOS)测试结果表明,C1qbp介导的OXPHOS增强对于CD8+T细胞分化的表观遗传调节是必不可少的。活化的CD8+ T细胞比活化的CD4+T细胞有更大的糖酵解和OXPHOS需求,CD8+T细胞受损OXPHOS的影响更大。
总之,研究发现C1qbp在CD8+T细胞中作为正调节因子的关键功能分化。通过控制与OXPHOS偶联的代谢物,证明C1qbp有助于建立CD8+T细胞的表观遗传和转录程序,在线粒体代谢和CD8+T细胞之间提供了一种分化机制联系。此外,这些代谢物补充或靶向OXPHOS可能在癌症、传染病和自身免疫性疾病的T细胞治疗中有重要应用。